新冠两个抗体阴性但N基因阳性(新冠两个抗体阴性但n基因阳性正常吗)

heiwantiyu 22-12-18 132阅读

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新冠病毒检测,为何一会阴性,一会阳性?

新冠肺炎疫情发生已经快4个月了,中国疫情已经控制住了,但还有少数病人出院后的复检结果又是阳性。这是为什么呢?这部分人会不会再传染别人了呢?

按照第六版之前的出院标准,经过治疗后,体温恢复正常3天以上,呼吸道症状明显好转,肺部影响学显示急性渗出性病变明显改善,连续两次呼吸道标本核酸检测阴性(采样时间至少间隔1天)。满足以上条件,可解除隔离出院。问题出在哪里呢?

原因之一:检测 *** 本身可能存在问题

这些患者出院前的检测结果为阴性,复检又是阳性,情况说明病毒并没有完全清除,之前的两次阴性不是真正的阴性,是假阴性,上呼吸道的咽拭子未必能反映病毒的实际情况。为什么会是假阴性?

目前采用的定量PCR的 *** ,其实对操作人员的技术要求比较高,样本准备或者说采样,是可能引起假阴性的重要一步。

采的是患者的咽拭子和痰液样本,检测新型冠状病毒(2019-nCoV) ORF1ab基因、N基因和E基因等三个基因。

从咽部和扁桃体取分泌物作细菌培养或病毒分离。如何采?在过分依赖核酸检测技术的同时,很大程度上忽略了采样这一最重要的步骤。样本采集不当,并未采集到合理位置的标本,病毒含量不能反映真实状况。

正常操作:

张开嘴巴,暴露咽喉,用培养管内的消毒长棉签以灵敏而轻柔的动作擦拭两侧腭弓和咽、扁桃体上的分泌物。然后将棉签插入试管,及时送检。关键步骤是擦拭,而不是蘸一下或者点一下就完了。

咽拭子的取样是非常非常关键的步骤!换句话说,如果取样不对,大概率是检测不到病毒的,或者说不同的医生取样,得到的结果有可能是相反的。

整个操作与检测过程中,假阴性的产生原因还有以下几点:1、样本保存和处理不当,造成处理过程中病毒RNA降解。2、提取效率低,病毒并未完全提取,或提取过程中病毒降解。3、检测分辨率低,检测下限过高,导致无法检出病毒。由此可见,无论是RT-qPCR检测步骤,还是检测之前的采样步骤,都要更大程度的避免产生假阴性。

另一个可能的原因与病毒复制的周期有关。病人在医院抗病毒治疗,并逐渐好转过程中,病毒载量会下降,当下降到一定程度的时候,是很可能测不到的。而且,人与病毒共生的可能性也是存在的,这也是之前卫生部专家提到的,新冠病毒与人长期共存的情况有可能存在。而病毒是否活跃,主要取决于人的免疫情况。这个道理有点像乙肝病毒,持续用药转阴了,但是并不代表完全清除了病毒。

这些人出院后,还会再感染吗?

理论上,这部分经过病毒感侵染,医院封闭治疗,病毒载量降低,体内已经产生较高的新冠病毒抗体IgG,在人体正常的免疫能力下,再次感染的可能性非常小。

这些患者还具有传染性吗?

临床中发现,符合国家诊疗方案解除隔离标准的患者,在出院后8天左右,家属有确诊的情况。患者体内核酸成阳性,可以理解为体内还有病毒存在,对于患者自身而言,可能不会再感染,但是对于密切接触者,却是一个潜在传染源。对于疫情控制而言,假阴性的结果比假阳性更可怕,也就是说,一个人本身已被感染,检测结果却是阴性,达不到收治条件,任由其自由活动,才是更大的传染源。对于一种新发传染病,宁可严格一点。

这种情况,应该怎么办?

首先,出院标准还是应该再严格一些。

在刚刚发布的《新冠诊疗方案第七版》,在出院标准上也较第六版有了更明确的要求,即此前要求做两次呼吸道标本核酸检测,现在明确为两次痰、鼻咽拭子等呼吸等标本核酸检测。这样其实能减少鼻咽拭子采样不到位造成的假阳性。

其次,出院后,应该继续隔离14天。

第七版中也删除了“解除隔离”的说法。在未明确是否还具有传染性的时候,从控制疾病传播的角度,删除“解除隔离”的做法是明智的。目前武汉要求出院患者到隔离点进行两周的隔离,减少复阳造成传染的可能风险。

第三,尝试增加采样点

比如上海等城市,需要检测肛拭子,肛拭子(粪便)核酸检测为阴性才可出院。他表示,由于上海的出院标准较《诊疗方案》更加严格,到目前为止,上海出院患者未出现一例核酸转阳。

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新冠出仓是看数值吗

新冠RT-PCR检测全称叫实时逆转录聚合酶链反应,它的原理是使用荧光报告分子,能够用来扩增DNA,从而将病毒微量的DNA扩增到能够检测的程度,RT-PCR检测不是只作用于检查新型冠状病毒的检查,它只是核酸检测过程中的一种 *** 。

新型冠状病毒RNA进行检测的技术,事实上有两种:一种是RT-PCR检测,一种是病原宏基因组测序(mNGS),它们都是用于诊断新冠病毒感染的 *** ,但核酸检测因为速度快(4~6小时)更适合在病情的爆发时期快速检测,所以得到普遍的推广应用,而基因测序比较慢(24~72小时)所以用的比较少,下面详细说下RT-PCR的检查 *** 。

1、采集样本,由于新冠病毒是通过呼吸道感染人体,所以样本要从呼吸道采集。目前常规的样本类型大致有2类:一类是用咽拭子、鼻拭子在人的上呼吸道擦拭采集取样;另一类是收集下呼吸道,但是在下呼吸取样的 *** 几乎不用。

2、先从样本中提取出病毒的RNA。具体来说就是在样本中加入核酸提取试剂,把病毒破坏,让核酸释放出来。通常还会把病毒RNA“反转录”成cDNA,这样会更方便检测。

3、进行cDNA的扩增与检测,这时候需要用到RT-PCR来扩增cDNA,扩增的同时,还会利用到荧光探针的东西同时工作。它会释放荧光信号,cDNA每完成一次扩增,荧光信号就会增加一点,同时会记录下荧光信号增加的Ct值。

4、最后就是根据检测仪记录的Ct值,进行检测结果分析,筛出阴性和阳性结果。

咨询记录 · 回答于2022-03-30

pcr实验室做新冠主要看图谱还是数值

亲 主要看数值的呢

为什么有图谱

图谱干什么的?

图谱跟数值是相辅相成的

初学看什么

新冠RT-PCR检测全称叫实时逆转录聚合酶链反应,它的原理是使用荧光报告分子,能够用来扩增DNA,从而将病毒微量的DNA扩增到能够检测的程度,RT-PCR检测不是只作用于检查新型冠状病毒的检查,它只是核酸检测过程中的一种 *** 。新型冠状病毒RNA进行检测的技术,事实上有两种:一种是RT-PCR检测,一种是病原宏基因组测序(mNGS),它们都是用于诊断新冠病毒感染的 *** ,但核酸检测因为速度快(4~6小时)更适合在病情的爆发时期快速检测,所以得到普遍的推广应用,而基因测序比较慢(24~72小时)所以用的比较少,下面详细说下RT-PCR的检查 *** 。1、采集样本,由于新冠病毒是通过呼吸道感染人体,所以样本要从呼吸道采集。目前常规的样本类型大致有2类:一类是用咽拭子、鼻拭子在人的上呼吸道擦拭采集取样;另一类是收集下呼吸道,但是在下呼吸取样的 *** 几乎不用。2、先从样本中提取出病毒的RNA。具体来说就是在样本中加入核酸提取试剂,把病毒破坏,让核酸释放出来。通常还会把病毒RNA“反转录”成cDNA,这样会更方便检测。3、进行cDNA的扩增与检测,这时候需要用到RT-PCR来扩增cDNA,扩增的同时,还会利用到荧光探针的东西同时工作。它会释放荧光信号,cDNA每完成一次扩增,荧光信号就会增加一点,同时会记录下荧光信号增加的Ct值。4、最后就是根据检测仪记录的Ct值,进行检测结果分析,筛出阴性和阳性结果。

阳性N,orf的数值还内标数值它们之间有关联?

它们都是s型?

ORF1ab基因和N基因阳性是核酸检测的结果,一般提示感染新型冠状病毒。ORF1ab基因和N基因(核衣壳蛋白基因)都是新型冠状病毒的组成基因,其中ORF1ab基因在病毒感染和致病中发挥了重要作用。ORF1ab基因阳性称为单通道阳性,此时可能是无症状感染者,若同时出现N基因阳性则称为双通道阳性,可作为确诊新冠病毒感染的依据,患者应立即前往医院进行隔离治疗,并上报自身的活动轨迹,避免影响自身和他人健康。由于核酸检测要求两次阳性才能确诊,若受检者之一次检测为阳性,而第二次检测为阴性,考虑可能是检测标本采集不合格、试剂盒灵敏度较低,或由于检测不及时,反复冷冻和解冻标本后造成病毒核酸破坏等因素引起的假阳性有关,需及时进行第三次,甚至更多次的核酸检测。若多次核酸发现之一次其实是误诊,在生活中也应积极做好自身防御,根据卫生部门规定,及时接种新冠疫苗。外出时应佩戴口罩,勤洗手、消毒,不去疫情高发地区或接触可疑人群,减少感染几率。饮食方面应营养均衡,减少吸烟、饮酒、熬夜等不良习惯,同时可以适当增加慢跑、游泳、快走等运动增强体质。

N基因orf基因和内标都是s型?

这个我也不敢确定的呢 因为我不是专业人员 给不了您专业性的回答

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新冠PCR实验室的工作流向是什么样的

职场导师霖霖

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之一步是“试剂准备 ”,必须保证全程“0”污染,严格精确操作,全手工分装。,第二步是进行“标本接收”,必须经过“酒精消毒+拆三层包装+扫码编号”等程序。,第三步是“核酸提取”,这个环节,操作人员必须 全神贯注!目不转睛!,第四步是“上机检测 ”。不同来源标本,所需试剂也不一样。普通筛查标本单试剂检测;新冠感染者样本需两种或三种试剂同时检测,确保结果的准确性。上机检测过程根据不同试剂、不同扩增程序、不同仪器需要40min-2h不等。工作人员介绍,新冠感染者样本除核酸检测外,还要进行病毒毒株分型,以便隔离病房分区管理。,第五步是进行“结果判读与审核”。扩增结束后,需要查看结果,分析数据,核对标本信息,结果发放。据了解,新冠感染者的结果审核比筛查样本更加复杂且繁琐,均至少采用双试剂检测,结果审核需要双试剂一一对应!所以,一份阳性标本仅报告审核就至少需要3小时!

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PCR证和新冠检测证区别

8229晓梅

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2、检测 *** 不一样:核酸检测采用PCR的 *** ,抗体检测 *** 可以有胶体金法等较多方式;

2022-06-04

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PCR证和新冠检测证区别

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pcr证是人员从事pcr相关工作时需要具备的上岗证,其报考条件是:年满18周岁;遵守法律、法规,恪守职业道德;具有良好的品行;具有正常履行职责的身体条件;具有生物学相关知识。pcr即聚合酶链式反应。

2022-06-04

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orflab和N基因数值多少是正常?

文 | 吕蒙

【核酸的基本知识】

新冠肺炎疫情暴发以来,“核酸”的大名“如雷贯耳”、老幼皆知,到底什么是核酸呢?

核酸就是脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)的总称,是遗传信息的携带者。简而言之就是个生命体最核心最特异的物质,由于核酸的唯一性,因此可以用来区分鉴别某种病毒的存在,核酸检测作为目前诊断新冠肺炎的“金标准”。

新冠肺炎的诊断手段有多种,病史、临床症状、影像学检查,但是都不具有唯一性,唯有“核酸检测”可以做到。

下面是国家卫健委对新冠肺炎诊断的说明,见于《新型冠状病毒肺炎诊疗方案(试行第八版修订版)》

诊断原则

根据流行病学史、临床表现、实验室检查等进行综合分析,作出诊断。新型冠状病毒核酸检测阳性为确诊的首要标准。未接种新型冠状病毒疫苗者新型冠状病毒特异性抗体检测可作为诊断的参考依据。接种新型冠状病毒疫苗者和既往感染新型冠状病毒者,原则上抗体不作为诊断依据。

诊断标准

疑似病例具备以下病原学或血清学证据之一者:

(1)新型冠状病毒核酸检测阳性;

(2)未接种新型冠状病毒疫苗者新型冠状病毒特异性IgM 抗体和IgG 抗体均为阳性。

【核酸检测的基本知识】

随着疫情的需要越来越多的检验人加入核酸检测队伍,虽然做过培训,但是很多人仅仅会简单的操作,而对核酸检测的原理和PCR仪知识的了解很缺乏,下文笔者尝试从最基础的知识谈起。

荧光PCR法(第二代PCR技术)是病毒检测的主流 *** ,也是目前我国新冠病毒检测采用最多的技术,其中实时荧光定量PCR法最常用。

上面几张图是实时荧光定量PCR仪的操作界面,其中可以看到FAM通道,VIC通道,CY5通道,N基因,ORF1ab基因,内标基因,Ct值这些名词,这些又是是什么意思呢?相互之间又有什么联系呢?

下面用一个表格来简单说一下

N 基因和ORF1ab基因

都是特异性基因,不会跟其他病原体重叠。设计时候,两个基因的序列不一样,导致灵敏度不一样,N基因的敏感性比ORF1ab基因高,但是特异性不如ORF1ab基因。

Ct值

(Cyclethreshold,循环、阈值的英文缩写)其含义是:在PCR循环过程中,每个反应管内的荧光信号到达设定阈值时所经历的循环数。模板的Ct值与该模板的起始拷贝数的对数存在线性关系。起始模板量浓度越高,Ct值越小;起始模板量浓度越低,Ct值越大。

看下面图示

内标基因

也称管家基因,通常选择在生物体各类细胞都能表达的基因,用于流程质控,但它的高表达性,也不能保证采样的准确性,想要采 *** 格的鼻咽试子还得规范的操作规程和技术规范。只有高质量的标本,内标基因才能发挥其流程质控的作用。

【结果分析】

01

ORF1ab基因(+)和N基因(+)双阳性:

如果有新冠肺炎症状,可报告“检出”;

如果临床症状不支持,建议用其他试剂复检,仍阳性报“检出”;

否则,考虑假阳性可能。

上图为ORF1ab基因和N基因双阳性,内标基因阳性

02

ORF1ab基因(+) 或者N基因(+)单阳性:

建议重新采样检测

如果该基因仍阳性且临床症状支持,可报告“检出”;

如果临床症状不支持,建议用其他试剂复检,仍阳性报“检出”;

否则,考虑假阳性可能。

上图为ORF1ab基因或N基因单阳性,内标基因阳性

03

ORF1ab基因(-) 和N基因(-)双阴性:

核酸检测结果为阴性,但是也存在假阴性的可能。

上图为ORF1ab基因和N基因双阴性,内标基因阳性

04

内标基因(-):

采样不合格,需要重新采样检测。

上图为ORF1ab基因、N基因、内标基因都是阴性。

【核酸检测的“不靠谱”】

核酸检测是确诊新冠肺炎的“金标准”,但是经常会看到这样的新闻:核酸检测了十几次才确诊阳性,还有刚开始检测为阳性,再进一步检查为阴性,为什么所谓的“金标准”还那么不靠谱?

所谓“金标准”是指当前临床医学界公认的诊断疾病的最可靠 *** ,可以正确的区分“有病”或“无病”。但不是100%,受人为的主观因素、客观因素的影响,比如核酸检测,核酸采样的不标准,病毒载量低等。

(一)假阳性

什么是假阳性?是指因为种种原因把不具备阳性症状的人检测出阳性的结果。

1、实验中阴性对照、空白对照出现了“翘尾”现象,甚至是明显的“阳性”扩增曲线。(实验室污染的可能性大)

上图可见阴性对照实验也出现了ORF1ab基因和N基因阳性

上图可见空白对照出现了翘尾现象

2、标本检测为阳性,但是流行病学史和临床症状不支持新冠的诊断,再次检测或多次检测结果均为阴性。(可能存在标本被污染或者或者标本顺序被弄混)

什么原因会导致新冠肺炎核酸检测假阳性?

1、实验室结构的问题。

2、操作程序不严谨,将扩增产物带入样本制备及加样区域。

3、生物安全柜可能会存在核酸污染。

4、疫苗引起的“假阳性”。

如何应对实验室检测的“假阳性”?

1、优化实验室结构

严把实验室工程建设质量关,杜绝分区之间漏气的情况。时常检查实验室传递窗及周围,两分区之间互通的墙壁插座,墙壁、地面等部位是否存在缝隙,及时妥善封闭。

经常观察各区的压力表、计算各区之间的压差是否在正常范围之内,如发现异常及时处理。扩增区对完成的PCR反应管密闭丢弃在医疗垃圾桶,严禁开盖。

比较理想的结构是在独立于PCR实验室的二级生物安全实验室进行核酸提取及加样,然后将加样的反应体系转运至扩增室进行下一步的实验。这样既可以避免扩增产物对样本制备过程的污染,也可以避免样本制备区泄漏的生物安全风险。

2、严格按照PCR分区操作,各分区的防护服、手套、消毒喷壶、离心机、加样枪等坚决不能混用,特别要注意一些清洁用品,如拖把、抹布等更是不能混用。

3、在生物安全柜加样操作时待检样本核酸产物和阳性质控品可放在不同区域进行操作,阳性质控品加样可不在生物安全柜内操作。若生物安全柜发生核酸污染,则需要更换高效过滤器,或使用可靠的核酸清除降解试剂进行处理。

4、新冠疫苗接种点要远离采样点;新冠疫苗接种人员和采样工作人员坚决不能 *** 操作;在接种工作台面上铺一次性无纺布,定期清理;按压的棉签不要带走,按医疗废物在接种点统一收集处理;发生安瓿破裂等现象及时处理,防止污染扩散;医疗机构环境监测避免在接种点采样检测。

(二)假阴性

什么是假阴性?就是指某项检查的结果实际应该是阳性,但由于操作、仪器、个人身体特性等原因导致结果呈阴性。

重复检测多次阴性后出现阳性结果、咽拭子标本多次检测阴性但最后在呼吸道灌洗液标本中检测出阳性结果、核酸检测阴性但CT影像筛查出现新型冠状病毒肺炎特征。

实际应该是阳性的标本,检测却是阴性。

什么原因会导致新冠肺炎核酸检测假阴性?

0 1

病毒载量低的问题

采样时期的影响:感染初期、患者逐渐康复后、间歇性排毒患自身携带病毒载量较低,可能造成检测“假阴性”。

采样部位的影响:肺泡灌洗液、深部痰>鼻拭子>咽拭子 采样深度、力度均影响病毒载量。

0 2

检测试剂的问题

核酸提取的效率与纯度,体外诊断试剂灵敏度差异,病毒变异性等因素。

0 3

其他问题

操作不够规范,临床实验室不够规范等。

如何应对实验室检测的“假阴性”

0 1

患者病程

不同病程期间,患者机体中的病毒载量不同。例如感染初期,患者自身携带病毒载量较低,可能造成检测“假阴性”。

患者逐渐康复后,病毒载量也逐步降低,此时核酸检测阳性率随之下降。面对这种情况,建议在不同时期进行多次核酸检测,对重点人群进行定期核酸检测,并做好临床观察与数据总结。

0 2

采样部位

采集肺泡灌洗液、深部痰优于鼻咽拭子,采集鼻拭子优于口咽拭子。 为保证结果准确性,建议采用鼻咽+口咽拭子的 *** ,即同时采集鼻咽及口咽拭子进行检测。

0 3

采样准确性

采样深度、力度要够,鼻咽、口咽拭子采集,均需取到较深部的上皮细胞,才可能能够检测到病毒存在。

0 4

检测试剂盒质量差异

现如今检测试剂盒的质量存在一定的差异。随着共同的努力和技术的不断优化进步,会逐渐的改善。因试剂问题造成的假阴性或者假阳性,可以换不用批号或厂家的试剂做对比检测。

05

其他 ***

疑似病例新冠病毒核酸检测阴性者,可进行IgM抗体检测,作为补充诊断的指标。 (新冠病毒IgG抗体检测也用于判断是否曾经被感染)

END

说明:本文为原创投稿,不代表检验医学新媒体观点。转载时请注明来源及原创作者姓名和单位。

编辑:徐少卿 审校:陈雪

新冠肺炎抗体检测igm是阴性 igg是阳性说明什么问题 这个能上飞机吗?

理论上而言,IgM体现在感染早期,也就是急性感染。IgG感染中后期,两者同存,可以辅助诊断为现症感染。只有IgG,而IgM阴性,说明感染后已恢复,并产生了短暂性的免疫力。这个应该是可以上飞机的。

什么是单基因阳性?

11月1日17点,朝阳区接昌平疾控部门通报,2名人员核酸检测结果分别呈阳性和单基因阳性,其活动点位涉及花家地实验小学朝来校区和陈经纶中学分校。

朝阳区立即启动应急响应机制,对两处校区进行临时管控,同步开展流调工作,对密接、次密接人员、高风险人员全面排查、追踪管控。目前,正在对师生和相关人员进行全员核酸检测。后续工作进展将及时通报。

什么是单基因阳性?

根据《新型冠状病毒肺炎实验室检测技术指南(第四版)》指出,新冠病毒核酸检测 *** 主要是实时荧光RT-PCR *** ,此检测 *** 针对新型冠状病毒基因组中开放读码框1ab(open reading frame 1ab , ORF1ab ) 和 核 壳 蛋 白 ( nucleocapsid protein,N)。

一般情况下,阳性患者的ORF1ab和N基因同时阳性,但也会出现ORF1ab或N基因某一个阳性,称为单阳性。对上述新冠病毒核酸检测为单阳性的病例,仍然需要再次取样进行实时荧光RT-PCR检测来判断是否为病例阳性。

“单基因阳性就是指新冠病毒核酸检测的两个基因片段中有一个呈阳性。单基因阳性不能确证此人感染新冠病毒,还需后续复测和结合流行病学史、临床表现、抗体检测、影像学检查等结果综合判定。”

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